Lupus-Antikoagulanzien (LA) werden als Antiphospholipid-Antikörper (APA) klassifiziert, obwohl sie in Wirklichkeit gegen phospholipidbindende Proteine, insbesondere β2-Glykoprotein I und Prothrombin, gerichtet sind. Das Vorhandensein von persistierenden LA ist stärker mit Thrombose, Schwangerschaftsmorbidität und Rezidiven assoziiert als die in Festphasentests nachgewiesenen Kriterien Antikörper (aCL & aβ2GPI). LA sind eine heterogene Gruppe von Autoantikörpern, die aufgrund ihres Verhaltens in phospholipidabhängigen Gerinnungstests nachgewiesen werden, nachdem andere mögliche Ursachen für erhöhte Gerinnungszeiten ausgeschlossen wurden. Zum Nachweis von LA werden Screening-, Bestätigungs- und Mischtests durchgeführt.
Bei Screening-Tests wird in der Regel verdünntes Phospholipid verwendet, um die gerinnungshemmende Wirkung von LA in vitro zu verstärken, was, falls vorhanden, die Gerinnungszeit verlängert. Da Screening-Tests auch aus anderen Gründen als LA verlängert werden können (z. B. Faktormangel, Antikoagulanzien-Therapie), werden alle erhöhten Screening-Tests nachuntersucht, um die Art der Anomalie zu bestimmen. Beim Bestätigungstest wird in der Regel der Screening-Test in identischer Weise durchgeführt, mit dem Unterschied, dass die Phospholipidkonzentration deutlich erhöht ist. Dies hat zur Folge, dass der LA teilweise oder vollständig überwältigt wird, was zu einer kürzeren Gerinnungszeit als beim Screening-Test führt und somit die Phospholipidabhängigkeit nachweist. Die Gerinnungszeiten werden in Verhältnisse umgerechnet, um Probleme der analytischen Variabilität auszugleichen. Eine Korrektur des Screening-Verhältnisses durch das Bestätigungsverhältnis um ≥10 % wird als konsistent mit dem Vorhandensein einer LA angesehen, sofern andere Ursachen für erhöhte Gerinnungszeiten ausgeschlossen sind. Die diagnostische Spezifität wird durch die Durchführung der Screening- und Bestätigungstests an 1:1-Mischungen aus Test- und Normalplasma verbessert, um Hemmungen nachzuweisen und Interferenzen zu verringern, obwohl der unvermeidliche Verdünnungseffekt diesen Aspekt der Analyse beeinträchtigen kann.
Antikörperheterogenität und Reagenzienvariabilität machen den Einsatz von mindestens zwei Assays mit unterschiedlichen Analyseprinzipien erforderlich, um akzeptable Nachweisraten zu erzielen. Assays der ersten Wahl sind die verdünnte Russell’s Viperngift-Zeit (dRVVT) und die LA-responsive APTT, eine Kombination, mit der die meisten klinisch signifikanten Antikörper nachgewiesen werden können. Unsere Labors verwenden in diesem Zusammenhang eine verdünnte APTT (dAPTT), bei der ein Silika-Aktivator und eine niedrige Phospholipid-Konzentration verwendet werden, die aus einer Zusammensetzung von Phospholipid-Typen besteht, die auf LA ansprechen. Bei der dRVVT-Analyse werden ein verdünnter FX-Aktivator aus dem Gift der Russellviper (Daboia russellii), eine niedrige Konzentration von Phospholipid, das aus einer auf LA ansprechenden Zusammensetzung von Phospholipidtypen besteht, und Kalziumionen verwendet. Für den Bestätigungstest wird ein identisches Reagenz verwendet, allerdings mit dem Unterschied, dass dieselbe Phospholipid-Zubereitung in einer höheren Konzentration eingesetzt wird. Alle erhöhten dAPTT & dRVVT-Screening-Verhältnisse werden für den Bestätigungstest und den Screening- und Bestätigungs-Mischtest reflektiert und mit einem interpretierenden Kommentar angegeben. Patienten mit LA können in einem oder beiden dAPTT & dRVVT-Testmedleys postitiv sein.