1 Folyékony vegyszer
A peroxi-ecetsav vagy peracetsav volt az első csíraölő szer, amelyet az izolátorok sterilizálására használtak, és hatékonysága, alacsony költsége és a legtöbb műanyaggal való kompatibilitása miatt még mindig használják. Alacsony koncentrációban és hőmérsékleten, valamint folyékony formában szerves anyagok jelenlétében is hatékony, bár nem hatol át a paraziták cisztáin és ízeltlábúak petéin (van der Gulden és van Erp, 1972). A laboratóriumi vegyszerek beszállítóitól 40%-os per ecetsavtartalmú folyadékként kapható. A perecetsav nagy előnye, hogy gőz- és folyadékfázisban is hatékony (Block, 2001; Trexler, 1984). Az 1-2%-os oldat szobahőmérsékleten történő permetezésekor keletkező gőz 15 percen belül inaktiválja a legellenállóbb baktériumokat és penészspórákat, a folyadék közvetlen alkalmazása pedig 1 percen belül éri el ugyanezt a hatást (Trexler, 1984). A per ecetsavat néha 4%-os koncentrációban használják, de a tényleges gnotobiotikus alkalmazásokból nincs bizonyíték arra, hogy ez hatékonyabb lenne, mint az 1%-os (R. Orcutt, személyes közlés, 2014. március). Az optimális sporicid aktivitás gőzfázisban 80%-os relatív páratartalom mellett érhető el. A per ecetsavoldatot mindig közvetlenül a felhasználás előtt kell elkészíteni, mert 24 óra alatt erejének körülbelül a felét elveszíti. 30 perc kontaktidő elegendő. A per ecetsav maró hatású, és irritálja a szemet, a bőrt és a légutakat. A per ecetsavat használó személyzetnek kesztyűt, eldobható ruházatot és teljes arcú, vegyszerszűrőbetétes légzőkészüléket kell viselnie. A perecetsavat a Környezetvédelmi Ügynökség, a Foglalkozásbiztonsági és Egészségügyi Hivatal vagy a Nemzeti Toxikológiai Program nem tekinti rákkeltőnek, és nem genotoxikus vagy mutagén (Malchesky, 2001), bár daganatpromóter lehet.
A perecetsav és a hidrogén-peroxid kombinációja szinergikus antimikrobiális hatást eredményez (Block, 2001). A Spor-Klenz™ (Steris Life Sciences), egy 1% hidrogén-peroxidot és 0,08% per ecetsavat tartalmazó, használatra kész sterilizáló oldat, széles körű sporicid hatékonysággal rendelkezik, és 20 perc érintkezési idő után 20°C-on teljesen inaktiválja a Mycobacterium spp.-t (Rutala és mtsi., 1991). A gnotobiotikumok esetében elfogadott sterilizálószerré vált. A javasolt kontaktidő 1 óra. A peracetsavat és a hidrogén-peroxidot kombináló egyéb termékek is rendelkezésre állnak, az alábbiakban említettek szerint.
A gnotobiotikumoknál jelenleg a folyékony formában lévő klór-dioxid a leggyakrabban használt sterilizálószer. Rendkívül hatékony minden mikroorganizmus ellen, és a peracetsavhoz hasonlóan gáz- és folyadékfázisban egyaránt hatásos (Jeng és Woodworth, 1990; Knapp és Battisti, 2001; Orcutt és mtsai., 1981; Pell-Walpole és Waller, 1984). Gáz halmazállapotban 1075-ször jobban sporicid, mint az etilén-oxid (Jeng és Woodworth, 1990). A folyékony klór-dioxid sterilizálószerek közé tartozik az Exspor™ (Ecolab Inc.) és a Clidox-S™ (Pharmacal Research Laboratories). Ezek két részből, egy nátrium-klorit bázisoldatból és egy savas aktivátorból állnak, amelyeket közvetlenül az alkalmazás előtt vízzel összekeverünk, hogy klórsav és klór-dioxid oldatot képezzenek. Legalább 30 perc érintkezési idő ajánlott. Az ilyen termékek korrodálhatják a rozsdamentes acélt.
A Steriplex™ SD (sBioMed) egy kétkomponensű termék, amely ezüstöt, peracetsavat és etanolt használ (0,015%, 0,15%, illetve 10% az aktivált termékben). Fertőtlenítőszerként, nem sterilizálószerként kerül forgalomba kórházi és egyéb alkalmazásokhoz. A gyártó azonban azt állítja, hogy sporicid, baktericid, fungicid és viricid; gyorsan inaktiválja a Clostridium difficile és a Bacillus subtilis spórákat; nem irritál; és az aktiválást követően 60 napig eltartható (Robison, 2012; sBioMed, 2013a, b, c). A Steriplex™ SD-t elkezdték elfogadni gnotobiotikus felhasználásra (C. Bell, személyes közlés, 2014. január). Tesztjeinkben a Steriplex™ SD 10 perc alatt elpusztította a Geobacillus stearothermophilus 106 spórás csíkját, a Bacillus atropheus 106 csíkját pedig 30 perc alatt.
A többi folyékony sterilizáló és “magas szintű” fertőtlenítő termék közé tartozik az Actril™ (0.08%-os peracetsav és 1,0%-os hidrogén-peroxid; Mar Cor Purification), Cidexplus™ 28 napos oldat (3,4%-os glutaraldehid; Johnson & Johnson), Minncare™ (4.5% peracetsav és 22,0% hidrogén-peroxid; Minntech BV), PeridoxRTU™ (4,0-4,8% hidrogén-peroxid és 0,17-0,29% peracetsav; Contec Inc.), Vimoba™ (klór-dioxid; Quip Laboratories), Sanosil S010™ (5% hidrogén-peroxid és 0.01% ezüst-nitrát; Sanosil International), Sporgon™ (7,35% hidrogén-peroxid és 0,23% PAA; Decon Laboratories) és Wavicide-01™ (2,65% glutaraldehid; Medical Chemical Corporation). Nincs tudomásunk arról, hogy e termékek bármelyikének a gnotobiotikumokban való alkalmazására vonatkozó értékeléséről beszámoltak volna.
Az egészségügyben és az élelmiszer-feldolgozásban alkalmazott folyékony sterilizáló és fertőtlenítő eljárások vizsgálatáról nagy mennyiségű szakirodalom áll rendelkezésre; sajnos azonban kevés információ áll rendelkezésre az összehasonlító hatékonyságról vagy a gnotobiotikumokra közvetlenül alkalmazott szabványosított vizsgálatokról. A felhasználóknak tisztában kell lenniük azzal, hogy a szabványosított vizsgálati módszerek eredményei jelentősen eltérhetnek. A felületeken lévő organizmusokat szinte mindig nehezebb elpusztítani, mint a szuszpenzióban lévőket (Berube et al., 2001; Gibson et al., 1995; Sagripanti és Bonifacino, 1999, 2000; Springthorpe és Sattar, 2005; van Klingeren et al., 1998), és a felületi vizsgálatok során a különböző anyagok eltérő eredményeket adhatnak (Thorn et al., 2013). Ráadásul a szabványosított tesztek eredményei nem feltétlenül jelzik a hatékonyságot abban a környezetben, amelyben a sterilizálószereket és eljárásokat ténylegesen használni fogják (Gibson et al., 1995; R. Orcutt, személyes közlés, 2014. március). Véleményünk szerint a szabványos laboratóriumi tesztek alkalmazása a megfelelően használt, hatékony sterilizálószereknek bizonyult termékek összehasonlítására sokkal kisebb értékű, mint annak meghatározása, hogy egy sterilizálószer alkalmazása – vagyis az eljárások, amelyekben használják – hatékony és megbízható. Az általunk alkalmazott módszereket e fejezet megfelelő helyein ismertetjük. Egy utolsó ajánlás, hogy bár valaki a folyékony sterilizálás ellenőrzése mellett dönt, fontos annak megállapítása, hogy a sterilizálás valódi, és nem csupán látszólagos a növekedés gátlása miatt. Ez történhet hígítási technikák, semlegesítő közegek vagy ezek kombinációinak alkalmazásával. A Dey-Engley semlegesítő leves jól működik klór-dioxid és per ecetsav sterilizálószerekkel (Espigares és mtsai., 2003; Sutton és mtsai., 2002; Terleckyj és Axler, 1987). A mi kezünkben azonban nem semlegesítette a Steriplex SD™-t.
Az aeroszolos sterilizálószerek használatával kapcsolatban az intézményi környezet-egészségügyi és biztonsági munkatársakkal való együttműködés javasolt. Munkaveszély-értékelést kell végezni a megfelelő egyéni védőfelszerelés (vegyi légzőkészülék, kesztyű, védőszemüveg, arcvédő stb.) és a műszaki ellenőrzés, például a vegyi gőzöknek a személyzettől való elszívására szolgáló elszívólevegő használatának megvalósítása érdekében.