Lupus anticoagulant (LA) sono classificati come anticorpi antifosfolipidi (APA), sebbene siano in realtà diretti contro proteine leganti i fosfolipidi, in particolare, β2 glicoproteina I e protrombina. La presenza di LA persistenti ha una maggiore associazione con la trombosi, la morbilità della gravidanza e la recidiva rispetto ai criteri anticorpi rilevati in fase solida (aCL & aβ2GPI). I LA sono un gruppo eterogeneo di autoanticorpi che vengono rilevati per inferenza in base al loro comportamento nei test di coagulazione dipendenti dai fosfolipidi dopo che sono state escluse altre possibili cause di tempi di coagulazione elevati. La rilevazione di LA comporta l’uso di test di screening, di conferma e di miscelazione.
I test di screening utilizzano comunemente fosfolipide diluito per accentuare l’effetto anticoagulante in vitro di LA, che se presente, prolungherà il tempo di coagulazione. I test di screening possono essere prolungati per ragioni diverse dal LA, (es. carenze di fattori, terapia anticoagulante), quindi tutti i test di screening elevati ricevono analisi di follow-up per aiutare a definire la natura di qualsiasi anomalia. Il test di conferma generalmente comporta l’esecuzione del test di screening in modo identico, eccetto che la concentrazione di fosfolipidi viene marcatamente aumentata. Questo ha l’effetto di sopraffare parzialmente o completamente il LA e quindi porta a un tempo di coagulazione più breve rispetto al test di screening, evidenziando così la dipendenza dai fosfolipidi. I tempi di coagulazione sono convertiti in rapporti per mitigare i problemi di variabilità analitica. La correzione del rapporto di screening per il rapporto di conferma di ≥10% è considerato coerente con la presenza di un LA, a condizione che altre cause di tempi di coagulazione elevati sono esclusi. La specificità diagnostica viene migliorata eseguendo i test di screening e di conferma su miscele 1:1 di test e plasma normale per evidenziare l’inibizione e ridurre le interferenze, anche se l’inevitabile effetto di diluizione può compromettere questo aspetto dell’analisi.
L’eterogeneità anticorpale e la variabilità dei reagenti richiedono l’uso di almeno due test, di diverso principio analitico, per ottenere tassi di rilevamento accettabili. I test di prima linea sono il tempo diluito del veleno della vipera di Russell (dRVVT) e l’APTT reattivo al LA, un abbinamento che rileverà la maggior parte degli anticorpi clinicamente significativi. I nostri laboratori impiegano a questo proposito un APTT diluito (dAPTT), che impiega un attivatore di silice e una bassa concentrazione di fosfolipide con una composizione di tipi di fosfolipidi che è LA-responsivo. L’analisi dRVVT impiega un attivatore FX diluito dal veleno della vipera di Russell (Daboia russellii), una bassa concentrazione di fosfolipide che comprende una composizione di tipi di fosfolipidi che è LA-responsivo e ioni di calcio. Il test di conferma prevede un reagente identico, tranne che la stessa preparazione di fosfolipidi viene impiegata a una concentrazione più elevata. Tutti i rapporti elevati dAPTT & dRVVT schermo sono riflessi per ricevere il test di conferma, e lo schermo e confermare test di miscelazione, e sono riportati con commento interpretativo. I pazienti con LA possono essere postitivi in uno o entrambi i medley di test dAPTT & dRVVT.