1 Químico Líquido
Ácido Peroxiacético, ou peracético, foi o primeiro germicida usado para esterilizar isoladores e ainda é usado devido à sua eficácia, baixo custo e compatibilidade com a maioria dos plásticos. É eficaz em baixas concentrações e temperaturas e, na forma líquida, na presença de matéria orgânica, embora não penetre nos quistos parasitas e nos ovos de artrópodes (van der Gulden e van Erp, 1972). Está disponível nos fornecedores de químicos de laboratório como um líquido contendo 40% de ácido peracético. Uma grande vantagem do ácido peracético é a sua eficácia nas fases de vapor e líquido (Block, 2001; Trexler, 1984). O vapor gerado quando uma solução de 1-2% é pulverizada à temperatura ambiente irá inativar as bactérias mais resistentes e os esporos de mofo dentro de 15 min, e a aplicação direta do líquido alcança a mesma ação dentro de 1 min (Trexler, 1984). O ácido peracético é às vezes utilizado a uma concentração de 4%, mas não há evidências das aplicações gnotobióticas reais de que isso seja mais eficaz do que 1% (R. Orcutt, comunicação pessoal, março de 2014). A atividade esporicida ideal na fase de vapor é atingida a 80% de umidade relativa. A solução de ácido peracético deve ser sempre preparada imediatamente antes da utilização, pois perde cerca de metade da sua força em 24 h. Trinta minutos de tempo de contacto é suficiente. O ácido peracético é corrosivo e é irritante para os olhos, pele e vias respiratórias. O pessoal que usa ácido peracético deve usar luvas, roupas descartáveis e um respirador de rosto inteiro com cartuchos de filtro químico. O ácido peracético não é considerado cancerígeno pela Agência de Proteção Ambiental, Administração de Segurança e Saúde Ocupacional ou pelo Programa Nacional de Toxicologia, e não é genotóxico ou mutagênico (Malchesky, 2001), embora possa ser um promotor tumoral.
Combinando ácido peracético com peróxido de hidrogênio resulta em atividade antimicrobiana sinérgica (Block, 2001). Spor-Klenz™ (Steris Life Sciences), uma solução esterilizante pronta para usar contendo 1% de peróxido de hidrogênio e 0,08% de ácido peracético, tem ampla eficácia esporicida e inativa completamente Mycobacterium spp. após 20 minutos de tempo de contato a 20°C (Rutala et al., 1991). Tornou-se um esterilizante aceito para os gnotobióticos. É recomendado um tempo de contacto de 1 h. Outros produtos que combinam ácido peracético e peróxido de hidrogênio estão disponíveis, como observado abaixo.
O dióxido de cloro na forma líquida é agora o esterilizante mais comumente usado em gnotobióticos. É altamente eficaz contra todos os microorganismos e, como o ácido peracético, é eficaz tanto na fase gasosa como na fase líquida (Jeng e Woodworth, 1990; Knapp e Battisti, 2001; Orcutt et al., 1981; Pell-Walpole e Waller, 1984). É 1075 vezes mais esporicida no estado gasoso do que o óxido de etileno (Jeng e Woodworth, 1990). Os esterilizantes de dióxido de cloro líquido incluem Exspor™ (Ecolab Inc.) e Clidox-S™ (Pharmacal Research Laboratories). Estes são compostos de duas partes, uma solução base de clorito de sódio e um ativador ácido, que são combinados e misturados com água imediatamente antes da aplicação para formar uma solução de ácido cloroso e dióxido de cloro. Recomenda-se um tempo de contacto de pelo menos 30 minutos. Tais produtos podem corroer o aço inoxidável.
Steriplex™ SD (sBioMed) é um produto em duas partes que utiliza prata, ácido peracético e etanol (0,015%, 0,15%, e 10%, respectivamente, no produto ativado). É vendido como desinfetante, não como esterilizante, para aplicações hospitalares e outras. Entretanto, é declarado pelo fabricante como esporicida, bactericida, fungicida e viricida; para inativar rapidamente esporos de Clostridium difficile e Bacillus subtilis; para ser não irritante; e para ter um prazo de validade de 60 dias após a ativação (Robison, 2012; sBioMed, 2013a, b, c). Steriplex™ SD começou a ser adotado para uso gnotobiótico (C. Bell, comunicação pessoal, janeiro de 2014). Em nossos testes, Steriplex™ SD matou Geobacillus stearothermophilus 106 spore strips em 10 min e Bacillus atropheus 106 strips em 30 min.
Outros produtos esterilizantes líquidos e desinfetantes de ‘alto nível’ incluem Actril™ (0.08% ácido peracético e 1,0% peróxido de hidrogênio; Mar Cor Purificação), Cidexplus™ Solução de 28 dias (3,4% glutaraldeído; Johnson & Johnson), Minncare™ (4.5% ácido peracético e 22,0% peróxido de hidrogênio; Minntech BV), PeridoxRTU™ (4,0-4,8% peróxido de hidrogênio e 0,17-0,29% ácido peracético; Contec Inc.), Vimoba™ (dióxido de cloro; Quip Laboratórios), Sanosil S010™ (5% peróxido de hidrogênio e 0.01% nitrato de prata; Sanosil International), Sporgon™ (7,35% peróxido de hidrogênio e 0,23% PAA; Decon Laboratories), e Wavicide-01™ (2,65% glutaraldeído; Medical Chemical Corporation). Não temos conhecimento de relatórios de avaliação de nenhum desses produtos para uso em gnotobióticos.
Existe um grande volume de literatura sobre testes de procedimentos líquidos esterilizantes e desinfetantes em cuidados de saúde e processamento de alimentos; infelizmente, porém, há poucas informações sobre a eficácia comparativa ou testes padronizados como aplicados diretamente aos gnotobióticos. Os usuários devem estar cientes de que os resultados dos métodos de teste padronizados podem variar consideravelmente. Organismos em superfícies são quase sempre mais difíceis de matar do que aqueles em suspensão (Berube et al., 2001; Gibson et al., 1995; Sagripanti e Bonifacino, 1999, 2000; Springthorpe e Sattar, 2005; van Klingeren et al., 1998), e, em testes de superfície, materiais diferentes podem produzir resultados diferentes (Thorn et al., 2013). Além disso, os resultados dos testes padronizados não indicam necessariamente a eficácia no ambiente em que os esterilizantes e procedimentos serão realmente utilizados (Gibson et al., 1995; R. Orcutt, comunicação pessoal, março de 2014). A nosso ver, a utilização de testes laboratoriais padrão para comparar produtos bem estabelecidos para serem esterilizantes eficazes quando utilizados adequadamente tem muito menos valor do que determinar que as aplicações de um esterilizante – ou seja, os procedimentos em que é utilizado – são eficazes e confiáveis. Os métodos que utilizamos são descritos em locais relevantes neste capítulo. Uma recomendação final é que, embora se opte por verificar a esterilização líquida, é importante determinar que a esterilização é real e não meramente aparente devido à inibição do crescimento. Isto pode ser feito através do uso de técnicas de diluição, meios neutralizantes, ou combinações destes. O caldo neutralizante Dey-Engley funciona bem com os esterilizantes de dióxido de cloro e ácido peracético (Espigares et al., 2003; Sutton et al., 2002; Terleckyj e Axler, 1987). No entanto, em nossas mãos não neutralizou o Steriplex SD™.
A equipe da instalação de nitrobiótico é aconselhada a trabalhar com seu pessoal institucional de saúde e segurança ambiental em relação ao uso de esterilizantes aerossolizados. Deve ser realizada uma avaliação de risco de trabalho para implementar o uso do equipamento de proteção pessoal apropriado (respirador químico, luvas, óculos de proteção, proteção facial, etc.) e controles de engenharia, tais como ar de exaustão para retirar os vapores químicos do pessoal.