Lupusové antikoagulanty (LA) jsou klasifikovány jako antifosfolipidové protilátky (APA), ačkoli jsou ve skutečnosti namířeny proti proteinům vázajícím fosfolipidy, zejména β2 glykoproteinu I a protrombinu. Přítomnost perzistujících LA má větší souvislost s trombózou, morbiditou v těhotenství a recidivou než kriteriální protilátky detekované v testech na pevné fázi (aCL & aβ2GPI). LA jsou heterogenní skupinou autoprotilátek, které jsou detekovány na základě inference založené na jejich chování ve fosfolipid-dependentních koagulačních testech po vyloučení jiných možných příčin zvýšeného času srážení. Detekce LA zahrnuje použití screeningových, konfirmačních a směsných testů.
Screeningové testy běžně využívají zředěný fosfolipid, aby se zdůraznil antikoagulační účinek LA in vitro, který v případě přítomnosti prodlouží dobu srážení. Screeningové testy mohou být prodlouženy i z jiných důvodů, než je nedostatek LA (např. nedostatek faktorů, antikoagulační léčba), proto se u všech zvýšených screeningových testů provádějí následné analýzy, které pomohou definovat povahu případné abnormality. Potvrzovací test obecně zahrnuje provedení screeningového testu identickým způsobem s tím rozdílem, že koncentrace fosfolipidů je výrazně zvýšena. To má za následek částečné nebo úplné zahlcení LA, a proto vede ke kratší době srážení než screeningový test, čímž se prokáže závislost na fosfolipidech. Časy srážení se převádějí na poměry, aby se zmírnily problémy s analytickou variabilitou. Korekce screeningového poměru konfirmačním poměrem o ≥ 10 % se považuje za konzistentní s přítomností LA za předpokladu, že jsou vyloučeny jiné příčiny zvýšených časů srážení. Diagnostická specifičnost se zvyšuje prováděním screeningových a konfirmačních testů na směsích testované a normální plazmy v poměru 1:1, aby se prokázala inhibice a snížily interference, ačkoli nevyhnutelný efekt ředění může tento aspekt analýzy ohrozit.
Heterogenita protilátek a variabilita činidel vyžadují použití nejméně dvou testů s různým analytickým principem, aby bylo dosaženo přijatelné míry detekce. Testy první volby jsou zředěný čas jedu Russellovy zmije (dRVVT) a APTT reagující na LA, což je dvojice, která odhalí většinu klinicky významných protilátek. Naše laboratoře v tomto ohledu používají zředěný APTT (dAPTT), který využívá aktivátor z oxidu křemičitého a nízkou koncentraci fosfolipidu složeného ze složení typů fosfolipidů reagujících na LA. Potvrzovací test zahrnuje přidání koncentrovaného fosfolipidu pocházejícího z krevních destiček. dRVVT analýza využívá zředěný aktivátor FX z jedu Russellovy zmije (Daboia russellii), nízkou koncentraci fosfolipidu tvořeného složením typů fosfolipidů, které reaguje na LA, a vápenaté ionty. Potvrzovací test zahrnuje identické činidlo s tím rozdílem, že se použije stejný fosfolipidový přípravek ve vyšší koncentraci. Všechny zvýšené poměry dAPTT & dRVVT screeningu jsou reflektovány pro příjem konfirmačního testu a smíšených testů screeningu a konfirmace a jsou uváděny s interpretačním komentářem. Pacienti s LA mohou být pozitivní v jednom nebo obou dAPTT & dRVVT testových směsích.