März 2020 Teilen
Zellisolierungsmethoden und -technologien verwenden entweder einen positiven oder negativen Zellseparationsansatz. Hier sind einige der Unterschiede, die bei der Zellseparation zu beachten sind:
Positive vs. Negative Selektion: Was ist der Unterschied?
Bei der positiven Selektion wird die gewünschte Zellpopulation mit einem für einen Zelloberflächenmarker (CD4, CD8 usw.) spezifischen Antikörper selektiert.
Bei der negativen Selektion werden mehrere Zelltypen entfernt, wobei der gewünschte Zelltyp unangetastet bleibt. Ähnlich wie bei der positiven Selektion werden die Zellen mit Antikörpern markiert, die auf bestimmte Zelloberflächenmarker oder -populationen abzielen. Bei der Negativselektion werden jedoch die unerwünschten Zellen markiert und anschließend entfernt.
Welche Vor- und Nachteile haben die beiden Verfahren?
Beide, die Positiv- und die Negativselektion, haben ihre Vor- und Nachteile.
Einer der Hauptvorteile der Positivselektion besteht darin, dass die isolierten Zellen im Vergleich zur Negativselektion hoch gereinigt sind. Diese hohe Reinheit ist auf die spezifischen Antikörper zurückzuführen, die für einen bestimmten Zelltyp verwendet werden. Außerdem können die positiv selektierten Zellen nacheinander isoliert werden. Bei vielen Technologien bleiben die positiv selektierten Zellen jedoch an die Antikörper oder andere Markierungsmittel gebunden, was sich auf einige nachgeschaltete Assays auswirken kann.
Die Negativselektion hingegen erzeugt Zielzellen, die nicht an Antikörper gebunden sind. Zellisolierungsprotokolle mit negativer Selektion sind auch schneller und einfacher als positive Selektionsverfahren. Ein Nachteil ist jedoch, dass Negativselektionsmethoden von Natur aus weniger rein sind als Positivselektionsmethoden, da es schwieriger ist, alle unerwünschten Zellen als eine erwünschte Zellpopulation ins Visier zu nehmen.
Wie wähle ich ein Zellseparationsverfahren aus?
Die Entscheidung für eine Positiv- oder Negativselektionsmethode hängt sowohl von Ihrer Zellpopulation als auch von den potenziellen Forschungsanwendungen ab.
Ist auf der Oberfläche des Zelltyps, den Sie ins Visier nehmen wollen, ein robuster Selektionsmarker vorhanden? Wenn ja, ziehen Sie positive Selektionsmethoden in Betracht. Falls nein, ziehen Sie negative Selektionsmethoden in Betracht.
Könnten Antikörper oder andere Markierungsmittel, die an Ihre Zielzellen gebunden sind, nachgeschaltete Assays oder Forschungsanwendungen beeinträchtigen? Wenn ja, kann es sinnvoller sein, negative Selektionsmethoden zu verwenden. Wenn nein, versuchen Sie es mit positiven Selektionsmethoden.