Los anticoagulantes lúpicos (LA) se clasifican como anticuerpos antifosfolípidos (APA), aunque en realidad se dirigen contra proteínas de unión a fosfolípidos, en particular, la β2 glicoproteína I y la protrombina. La presencia de LA persistentes tiene una mayor asociación con la trombosis, la morbilidad del embarazo y la recurrencia que los anticuerpos criterio detectados en los ensayos en fase sólida (aCL & aβ2GPI). Los LA son un grupo heterogéneo de autoanticuerpos que se detectan por inferencia basándose en su comportamiento en los ensayos de coagulación dependientes de fosfolípidos después de haber excluido otras posibles causas de tiempos de coagulación elevados. La detección de LA implica el uso de pruebas de cribado, de confirmación y de mezcla.
Las pruebas de cribado suelen emplear fosfolípidos diluidos para acentuar el efecto anticoagulante in vitro de LA, que si está presente, prolongará el tiempo de coagulación. Las pruebas de cribado pueden prolongarse por razones distintas a la LA, (es decir, deficiencias de factores, terapia anticoagulante), por lo que todas las pruebas de cribado elevadas reciben análisis de seguimiento para ayudar a definir la naturaleza de cualquier anomalía. La prueba de confirmación suele consistir en la realización de la prueba de cribado de forma idéntica, salvo que la concentración de fosfolípidos se incrementa notablemente. Esto tiene el efecto de sobrecargar parcial o totalmente la LA y, por lo tanto, conduce a un tiempo de coagulación más corto que el de la prueba de cribado, evidenciando así la dependencia de los fosfolípidos. Los tiempos de coagulación se convierten en ratios para mitigar los problemas de variabilidad analítica. La corrección del ratio de cribado por el ratio de confirmación en ≥10% se considera consistente con la presencia de una LA, siempre que se excluyan otras causas de tiempos de coagulación elevados. La especificidad diagnóstica se mejora realizando las pruebas de cribado y de confirmación en mezclas 1:1 de plasma normal y de prueba para evidenciar la inhibición y reducir las interferencias, aunque el inevitable efecto de dilución puede comprometer este aspecto del análisis.
La heterogeneidad de los anticuerpos y la variabilidad de los reactivos hacen necesario el uso de al menos dos ensayos, de diferente principio analítico, para lograr tasas de detección aceptables. Los ensayos de primera línea son el tiempo de veneno de víbora de Russell diluido (dRVVT) y el APTT que responde al LA, una combinación que detectará la mayoría de los anticuerpos clínicamente significativos. Nuestros laboratorios emplean un APTT diluido (dAPTT) a este respecto, que emplea un activador de sílice y una baja concentración de fosfolípido con una composición de tipos de fosfolípidos que es sensible al LA. El análisis dRVVT utiliza un activador FX diluido procedente del veneno de la víbora de Russell (Daboia russellii), una baja concentración de fosfolípido con una composición de tipos de fosfolípidos que responde a la LA e iones de calcio. La prueba de confirmación implica un reactivo idéntico, excepto que se emplea la misma preparación de fosfolípidos a una concentración más alta. Todos los índices elevados de dAPTT & dRVVT de pantalla se reflejan para recibir la prueba de confirmación, y las pruebas de mezcla de pantalla y confirmación, y se informan con un comentario interpretativo. Los pacientes con LA pueden ser positivos en una o ambas pruebas dAPTT & dRVVT medleys.