Marzo 2020 Condividi
I metodi e le tecnologie di isolamento cellulare utilizzano un approccio di separazione cellulare positivo o negativo. Ecco alcune delle differenze quando si considera un approccio di separazione cellulare:
Selezione Positiva vs. Negativa: Qual è la differenza?
La selezione positiva comporta il targeting della popolazione cellulare desiderata con un anticorpo specifico per un marcatore di superficie cellulare (CD4, CD8, ecc.). Le cellule mirate vengono poi trattenute per l’analisi a valle.
Selezione negativa è quando diversi tipi di cellule vengono rimossi, lasciando il tipo di cellule di interesse intatto. Simile ai metodi di selezione positiva, le cellule sono etichettate con anticorpi che hanno come target specifici marcatori della superficie cellulare o popolazioni. Tuttavia, nel caso della selezione negativa, le cellule indesiderate sono quelle etichettate e poi successivamente rimosse.
Quali sono i vantaggi e gli svantaggi di ciascuno?
Entrambi gli approcci di selezione positiva e negativa hanno i loro vantaggi e svantaggi.
Uno dei principali vantaggi della selezione positiva è che le cellule isolate sono altamente purificate rispetto alla selezione negativa. Questa elevata purezza è dovuta agli anticorpi specifici usati per colpire un particolare tipo di cellule. Inoltre, gli isolamenti sequenziali possono essere eseguiti su cellule selezionate positivamente. Molte tecnologie, tuttavia, lasciano le cellule selezionate positivamente legate agli anticorpi o ad altri agenti di etichettatura, che possono influenzare alcuni saggi a valle.
D’altra parte, la selezione negativa produce cellule mirate che non sono legate dagli anticorpi. I protocolli di isolamento delle cellule che utilizzano la selezione negativa sono anche più veloci e facili degli approcci di selezione positiva. Uno svantaggio, però, è che i metodi di selezione negativa sono intrinsecamente meno puri dei metodi di selezione positiva, poiché è più difficile prendere di mira tutte le cellule indesiderate rispetto a una popolazione di cellule desiderata.
Come faccio a scegliere un approccio di separazione cellulare?
La scelta di utilizzare un metodo di selezione positiva o negativa dipende sia dalla tua popolazione di cellule che dalle potenziali applicazioni di ricerca.
C’è un robusto marcatore di selezione sulla superficie del tipo di cellula che vuoi prendere di mira? Se sì, considera i metodi di selezione positiva. Se no, considera i metodi di selezione negativa.
Gli anticorpi o altri agenti di etichettatura attaccati alle tue cellule bersaglio potrebbero influenzare i saggi a valle o le applicazioni di ricerca? Se sì, potrebbe avere più senso usare metodi di selezione negativa. Se no, provate i metodi di selezione positiva.