Martie 2020 Share
Metodele și tehnologiile de izolare a celulelor utilizează fie o abordare pozitivă, fie una negativă de separare a celulelor. Iată câteva dintre diferențele atunci când se ia în considerare o abordare de separare celulară:
Selecție pozitivă vs. selecție negativă: Care este diferența?
Selecția pozitivă implică direcționarea populației de celule dorite cu un anticorp specific unui marker de suprafață celulară (CD4, CD8, etc.). Celulele vizate sunt apoi reținute pentru analize în aval.
Selecția negativă este atunci când mai multe tipuri de celule sunt eliminate, lăsând neatins tipul de celule de interes. Similar metodelor de selecție pozitivă, celulele sunt marcate cu anticorpi care vizează markerii sau populațiile specifice de suprafață celulară. Cu toate acestea, în cazul selecției negative, celulele nedorite sunt cele marcate și apoi îndepărtate ulterior.
Care sunt avantajele și dezavantajele fiecăreia?
Atât abordările de selecție pozitivă, cât și cele de selecție negativă au avantajele și dezavantajele lor.
Unul dintre principalele avantaje ale selecției pozitive este că celulele izolate sunt foarte purificate, în comparație cu selecția negativă. Această puritate ridicată se datorează anticorpilor specifici utilizați pentru a ținti un anumit tip de celule. În plus, se pot efectua izolări secvențiale pe celule selectate pozitiv. Cu toate acestea, multe tehnologii lasă celulele selectate pozitiv legate de anticorpi sau de alți agenți de marcare, ceea ce poate afecta unele teste din aval.
Pe de altă parte, selecția negativă produce celule vizate care nu sunt legate de anticorpi. Protocoalele de izolare a celulelor care utilizează selecția negativă sunt, de asemenea, mai rapide și mai ușoare decât abordările de selecție pozitivă. Cu toate acestea, un dezavantaj este că metodele de selecție negativă sunt în mod inerent mai puțin pure decât metodele de selecție pozitivă, deoarece este mai dificil să se țintească toate celulele nedorite decât o populație celulară dorită.
Cum aleg o abordare de separare celulară?
Alegerea de a utiliza o metodă de selecție pozitivă sau negativă depinde atât de populația dvs. celulară, cât și de potențialele aplicații de cercetare.
Există un marker de selecție robust pe suprafața tipului de celule pe care doriți să îl vizați? Dacă da, luați în considerare metodele de selecție pozitivă. Dacă nu, luați în considerare metodele de selecție negativă.
Ar putea anticorpii sau alți agenți de etichetare atașați la celulele vizate să afecteze testele din aval sau aplicațiile de cercetare? Dacă da, ar putea avea mai mult sens să folosiți metode de selecție negativă. Dacă nu, încercați metodele de selecție pozitivă.
.