March 2020 Share
Los métodos y tecnologías de aislamiento celular utilizan un enfoque de separación celular positiva o negativa. Estas son algunas de las diferencias cuando se considera un enfoque de separación celular:
Selección positiva vs. Selección negativa: ¿Cuál es la diferencia?
La selección positiva implica dirigir la población celular deseada con un anticuerpo específico para un marcador de superficie celular (CD4, CD8, etc.). Las células seleccionadas se retienen para el análisis posterior.
La selección negativa es cuando se eliminan varios tipos de células, dejando el tipo de célula de interés sin tocar. De forma similar a los métodos de selección positiva, las células se etiquetan con anticuerpos que se dirigen a marcadores o poblaciones específicas de la superficie celular. Sin embargo, en el caso de la selección negativa, las células no deseadas son las que se etiquetan y posteriormente se eliminan.
¿Cuáles son las ventajas y desventajas de cada uno?
Tanto los enfoques de selección positiva como los de selección negativa tienen sus ventajas y desventajas.
Una de las principales ventajas de la selección positiva es que las células aisladas están muy purificadas en comparación con la selección negativa. Esta alta pureza se debe a los anticuerpos específicos utilizados para dirigirse a un tipo de célula concreto. Además, se pueden realizar aislamientos secuenciales de las células seleccionadas positivamente. Sin embargo, muchas tecnologías dejan las células seleccionadas positivamente unidas a los anticuerpos u otros agentes de etiquetado, lo que puede afectar a algunos ensayos posteriores.
Por otro lado, la selección negativa produce células dirigidas que no están unidas a los anticuerpos. Los protocolos de aislamiento celular que utilizan la selección negativa también son más rápidos y fáciles que los enfoques de selección positiva. Sin embargo, una desventaja es que los métodos de selección negativa son intrínsecamente menos puros que los métodos de selección positiva, ya que es más difícil dirigirse a todas las células no deseadas que a una población celular deseada.
¿Cómo elijo un método de separación celular?
La elección de utilizar un método de selección positiva o negativa depende tanto de su población celular como de las posibles aplicaciones de investigación.
¿Existe un marcador de selección robusto en la superficie del tipo de célula al que desea dirigirse? Si es así, considere los métodos de selección positiva. Si no, considere los métodos de selección negativa.
¿Podrían los anticuerpos u otros agentes de etiquetado unidos a sus células objetivo afectar a los ensayos posteriores o a las aplicaciones de investigación? Si es así, puede tener más sentido utilizar métodos de selección negativa. Si la respuesta es negativa, pruebe con métodos de selección positiva.