Partilha Março 2020
Métodos e tecnologias de isolamento de células utilizam uma abordagem de separação de células positiva ou negativa. Aqui estão algumas das diferenças ao considerar uma abordagem de separação de células:
Seleção Positiva vs. Seleção Negativa: Qual é a diferença?
Seleção positiva envolve a seleção da população celular desejada com um anticorpo específico para um marcador de superfície celular (CD4, CD8, etc.). As células alvo são então retidas para análise posterior.
Seleção negativa é quando vários tipos de células são removidos, deixando o tipo de célula de interesse intocado. Semelhante aos métodos de seleção positiva, as células são rotuladas com anticorpos que visam marcadores de superfície ou populações específicas de células. No entanto, no caso da selecção negativa, as células não desejadas são as rotuladas e depois removidas.
Quais são as vantagens e desvantagens de cada uma delas?
As duas abordagens de selecção positiva e negativa têm as suas vantagens e desvantagens.
Uma das principais vantagens da selecção positiva é que as células isoladas são altamente purificadas quando comparadas com a selecção negativa. Esta alta pureza deve-se aos anticorpos específicos usados para atingir um determinado tipo de célula. Além disso, isolamentos sequenciais podem ser realizados em células selecionadas positivamente. Muitas tecnologias, entretanto, deixam as células selecionadas positivamente ligadas aos anticorpos ou outros agentes de rotulagem, o que pode afetar alguns ensaios a jusante.
Por outro lado, a seleção negativa produz células alvo que não são ligadas por anticorpos. Os protocolos de isolamento de células usando seleção negativa também são mais rápidos e fáceis do que as abordagens de seleção positiva. Uma desvantagem, entretanto, é que os métodos de seleção negativa são inerentemente menos puros que os métodos de seleção positiva, uma vez que é mais difícil atingir todas as células indesejadas do que uma população celular desejada.
Como eu escolho uma abordagem de separação de células?
A escolha de usar um método de seleção positiva ou negativa depende tanto da sua população celular quanto de potenciais aplicações de pesquisa.
Existe um marcador de seleção robusto na superfície do tipo de célula que você deseja atingir? Se sim, considere métodos de seleção positivos. Se não, considere métodos de seleção negativos.
Os anticorpos ou outros agentes de etiquetagem ligados às suas células alvo podem afetar os ensaios ou aplicações de pesquisa posteriores? Se sim, pode fazer mais sentido usar métodos de seleção negativos. Se não, tente métodos de seleção positivos.