Lupus antikoagulantia (LA) klassificeras som antifosfolipidantikroppar (APA), även om de i själva verket är riktade mot fosfolipidbindande proteiner, särskilt β2-glykoprotein I och protrombin. Förekomsten av persisterande LA har ett större samband med trombos, graviditetsmorbiditet och återfall än de kriterier antikroppar som påvisas i fastfasanalyser (aCL & aβ2GPI). LA är en heterogen grupp autoantikroppar som upptäcks genom inferens baserat på deras beteende i fosfolipidberoende koagulationsanalyser efter att andra möjliga orsaker till förhöjda koagulationstider har uteslutits. För att upptäcka LA används screening-, konfirmerings- och blandningstester.
Screeningtester använder vanligen utspädd fosfolipid för att accentuera LA:s antikoagulerande effekt in vitro, vilket i förekommande fall kommer att förlänga koagulationstiden. Screeningtest kan förlängas av andra orsaker än LA (t.ex. faktorbrist, antikoagulantiabehandling), så alla förhöjda screeningtest får uppföljningsanalyser för att hjälpa till att definiera vilken typ av abnormitet det rör sig om. Bekräftelsetestet innebär i allmänhet att screeningtestet utförs på ett identiskt sätt, förutom att fosfolipidkoncentrationen är markant förhöjd. Detta leder till att LA helt eller delvis överväldigas och därmed till en kortare koagulationstid än vid screeningtestet, vilket bevisar fosfolipidberoendet. Koagulationstiderna omvandlas till kvoter för att mildra problemen med analytisk variabilitet. Korrigering av screeningförhållandet med ≥10 % av bekräftelseförhållandet anses vara förenligt med förekomsten av LA, förutsatt att andra orsaker till förhöjda koagulationstider är uteslutna. Den diagnostiska specificiteten förbättras genom att screening- och bekräftelsetesterna utförs på 1:1-blandningar av test- och normalplasma för att bevisa hämning och minska interferenser, även om den oundvikliga utspädningseffekten kan äventyra denna aspekt av analysen.
Antikroppsheterogenitet och reagensvariabilitet gör det nödvändigt att använda minst två tester, med olika analytiska principer, för att uppnå acceptabla detektionsnivåer. Förstahandsanalyser är utspädd Russell’s viper venom time (dRVVT) och LA-responsiv APTT, en kombination som upptäcker de flesta kliniskt signifikanta antikroppar. Våra laboratorier använder en utspädd APTT (dAPTT) i detta avseende, som använder en kiseldioxidaktivator och en låg koncentration av fosfolipid bestående av en sammansättning av fosfolipidtyper som är LA-responsiv. Vid bekräftelsetestet tillsätts koncentrerad trombocytavledd fosfolipid. dRVVT-analysen använder utspädd FX-aktivator från giftet från Russells huggorm (Daboia russellii), en låg koncentration av fosfolipid bestående av en sammansättning av fosfolipidtyper som är LA-responsiva och kalciumjoner. För bekräftelsetestet används samma reagens med undantag för att samma fosfolipidpreparat används i högre koncentration. Alla förhöjda dAPTT & dRVVT screen ratios reflexeras för att få bekräftelsetestet, och screen- och bekräftelsemixtestet, och rapporteras med tolkningskommentar. Patienter med LA kan vara postitiva i ett eller båda dAPTT & dRVVT-testblandningarna.