1 flytande kemikalie
Perättiksyra, eller perättiksyra, var det första bakteriedödande medel som användes för att sterilisera isolatorer och används fortfarande på grund av sin effektivitet, låga kostnad och kompatibilitet med de flesta plaster. Den är effektiv vid låga koncentrationer och temperaturer och, i flytande form, i närvaro av organiskt material, även om den inte tränger igenom parasitcystor och leddjursägg (van der Gulden och van Erp, 1972). Det finns tillgängligt från leverantörer av laboratoriekemikalier som en vätska som innehåller 40 % perättiksyra. En stor fördel med perättiksyra är att den är effektiv i ång- och vätskefas (Block, 2001; Trexler, 1984). Den ånga som genereras när en 1-2 % lösning sprutas vid rumstemperatur inaktiverar de mest resistenta bakterierna och mögelsporerna inom 15 minuter, och direkt applicering av vätskan uppnår samma verkan inom 1 minut (Trexler, 1984). Perättiksyra används ibland i en koncentration på 4 %, men det finns inga bevis från faktiska gnotobiotiska tillämpningar för att detta är mer effektivt än 1 % (R. Orcutt, personlig kommunikation, mars 2014). Optimal sporicidal aktivitet i ångfasen uppnås vid 80 % relativ fuktighet. Perättiksyralösning ska alltid beredas omedelbart före användning, eftersom den förlorar ungefär hälften av sin styrka inom 24 timmar. 30 minuters kontakttid är tillräcklig. Perättiksyra är frätande och irriterar ögon, hud och luftvägar. Personal som använder perättiksyra bör bära handskar, engångskläder och en hel ansiktsandningsapparat med kemiska filterpatroner. Perättiksyra anses inte vara cancerframkallande av Environmental Protection Agency, Occupational Safety and Health Administration eller National Toxicology Program, och den är inte genotoxisk eller mutagen (Malchesky, 2001), även om den kan vara tumörfrämjande.
Kombination av perättiksyra med väteperoxid resulterar i synergistisk antimikrobiell aktivitet (Block, 2001). Spor-Klenz™ (Steris Life Sciences), en färdig steriliseringslösning som innehåller 1 % väteperoxid och 0,08 % perättiksyra, har en bred sporicid effekt och inaktiverar fullständigt Mycobacterium spp. efter 20 minuters kontakttid vid 20 °C (Rutala et al., 1991). Det har blivit ett accepterat steriliseringsmedel för gnotobiotika. En kontakttid på 1 timme rekommenderas. Andra produkter som kombinerar perättiksyra och väteperoxid finns tillgängliga, se nedan.
Khlordioxid i flytande form är nu det vanligaste steriliseringsmedlet för gnotobiotika. Den är mycket effektiv mot alla mikroorganismer och är liksom perättiksyra effektiv i både gas- och vätskefas (Jeng och Woodworth, 1990; Knapp och Battisti, 2001; Orcutt et al., 1981; Pell-Walpole och Waller, 1984). Den är 1075 gånger mer sporicid i gasform än etylenoxid (Jeng och Woodworth, 1990). Flytande klordioxidsteriliseringsmedel inkluderar Exspor™ (Ecolab Inc.) och Clidox-S™ (Pharmacal Research Laboratories). Dessa består av två delar, en baslösning av natriumklorit och en sur aktivator, som kombineras och blandas med vatten omedelbart före applicering för att bilda en lösning av klorös syra och klordioxid. En kontakttid på minst 30 minuter rekommenderas. Sådana produkter kan korrodera rostfritt stål.
Steriplex™ SD (sBioMed) är en tvådelad produkt som använder silver, perättiksyra och etanol (0,015 %, 0,15 % respektive 10 % i den aktiverade produkten). Den säljs som ett desinfektionsmedel, inte ett steriliseringsmedel, för sjukhus och andra tillämpningar. Tillverkaren uppger dock att den är sporicid, bakteriedödande, svampdödande och viricid, att den snabbt inaktiverar Clostridium difficile och Bacillus subtilis-sporer, att den inte irriterar och att den har en hållbarhetstid på 60 dagar efter aktivering (Robison, 2012; sBioMed, 2013a, b, c). Steriplex™ SD har börjat antas för gnotobiotisk användning (C. Bell, personlig kommunikation, januari 2014). I våra tester dödade Steriplex™ SD Geobacillus stearothermophilus 106 sporremsor på 10 minuter och Bacillus atropheus 106 remsor på 30 minuter.
Andra flytande steriliserande och ”högnivå”-desinficerande produkter inkluderar Actril™ (0.08 % peracetiksyra och 1,0 % väteperoxid; Mar Cor Purification), Cidexplus™ 28-dagars lösning (3,4 % glutaraldehyd; Johnson & Johnson), Minncare™ (4.5 % perättiksyra och 22,0 % väteperoxid; Minntech BV), PeridoxRTU™ (4,0-4,8 % väteperoxid och 0,17-0,29 % perättiksyra; Contec Inc.), Vimoba™ (klordioxid; Quip Laboratories), Sanosil S010™ (5 % väteperoxid och 0,5 % väteperoxid).01 % silvernitrat; Sanosil International), Sporgon™ (7,35 % väteperoxid och 0,23 % PAA; Decon Laboratories) och Wavicide-01™ (2,65 % glutaraldehyd; Medical Chemical Corporation). Vi känner inte till några rapporter om utvärdering av någon av dessa produkter för användning i gnotobiotika.
Det finns en stor mängd litteratur om testning av flytande steriliserings- och desinfektionsmedel inom hälso- och sjukvård och livsmedelsbearbetning; tyvärr finns det dock lite information om jämförande effektivitet eller standardiserad testning som tillämpas direkt på gnotobiotika. Användarna bör vara medvetna om att resultaten av standardiserade testmetoder kan variera avsevärt. Organismer på ytor är nästan alltid svårare att döda än organismer i suspension (Berube et al., 2001; Gibson et al., 1995; Sagripanti och Bonifacino, 1999, 2000; Springthorpe och Sattar, 2005; van Klingeren et al., 1998), och i yttester kan olika material ge olika resultat (Thorn et al., 2013). Dessutom visar resultaten av standardiserade tester inte nödvändigtvis på effektivitet i den miljö där steriliseringsmedel och förfaranden faktiskt kommer att användas (Gibson et al., 1995; R. Orcutt, personlig kommunikation, mars 2014). Enligt vår åsikt är användningen av standardiserade laboratorietester för att jämföra produkter som är väl etablerade som effektiva steriliseringsmedel när de används på rätt sätt av mycket mindre värde än att fastställa att ett steriliseringsmedels tillämpningar – det vill säga de förfaranden i vilka det används – är effektiva och tillförlitliga. De metoder vi använder beskrivs på relevanta ställen i detta kapitel. En sista rekommendation är att även om man väljer att verifiera vätskesterilisering är det viktigt att fastställa att steriliseringen är verklig och inte bara skenbar på grund av tillväxthämning. Detta kan göras med hjälp av utspädningstekniker, neutraliserande medier eller kombinationer av dessa. Dey-Engley neutraliserande buljong fungerar bra med steriliseringsmedel av klordioxid och perättiksyra (Espigares et al., 2003; Sutton et al., 2002; Terleckyj och Axler, 1987). I våra händer neutraliserade den dock inte Steriplex SD™.
Personalen vid notobiotiska anläggningar rekommenderas att samarbeta med institutionens personal för miljöhygien och säkerhet när det gäller användning av aerosoliserade steriliseringsmedel. En arbetsriskbedömning bör genomföras för att genomföra användningen av lämplig personlig skyddsutrustning (kemiskt andningsskydd, handskar, skyddsglasögon, ansiktsskydd etc.) och tekniska kontroller som t.ex. frånluft för att avlägsna kemiska ångor från personalen.